是誰給了科學家們和醫療人員滿滿的「大平台」！？——Recombinase Polymerase Amplification 之應用與限制

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整理・撰文：王如初、郭芷麟

 繼上一篇了解了 Recombinase Polymerase Amplification (RPA) （全文請點閱此） 的基本原理後，接下來就來跟大家說說這樣的技術，目前有怎樣的應用～

你用過嗎？PCR 界的革命新技術！——Recombinase Polymerase Amplification

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整理・撰文：郭芷麟

想一下，是不是每次實驗要做 PCR，我們幾乎都會再安排其他實驗？或是在接近中午的時間點上機，吃飽飯之後再來收 sample？

會有這樣預期心理的產生，就是因為我們知道上機之後，大約需要花費 1.5~2 個小時左右的時間等熱循環儀 （ thermal cycler） 來完成反應。雖然 PCR 的發明已經促使我們的研究得以更有效且方便的完成，然而科學家的追求創新的決心，是不可容小看的！

唯有不斷尋求，才有機會找到答案——探索未知的 RNA 區段-RACE

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整理・撰文：李俊廷

在顯赫的山壁、巖然的未踏之地上，攀岩者抱持著敬畏的心，以看似樸實卻不失細膩的動作將一個個勾環釘入岩壁。這種逐步探尋未知地帶的模式，在分子生物技術中也見得到。

今天要來跟各位介紹的技術是快速擴增 cDNA 末端 (Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE)。如果說在字面上 “RT-PCR vs. Real-time PCR 還在傻傻分不清楚？” 的話，那 RT-PCR 跟 RACE 就是在用途上，容易讓人混淆吧！

雖然 RACE 為 RT-PCR 的變奏版，在原理跟步驟上和 RT-PCR 有很多相似，但 RACE 卻能解決很多特別的問題。例如，分析兩端序列未知的 RNA、界定啟動子 (promoter) 下游、調查部分胺基酸序列已知的基因等…

只有堅持到最後，你才會知道你的目標是什麼——諾貝爾生醫獎

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整理・撰文：郭芷麟、梁博任

走在這條生技道路的你，有想過自己要變成怎樣的科學家嗎？或許你天生資質聰穎，也非常會做實驗，所以理所當然會成為一位傑出的科學家。但，如果是資質平庸的我們，難道遇到一點挫折或是壓力，就果斷放棄自己想要追尋的目標嗎？

其實，很多傑出的科學家，都跟你我一樣，不是什麼天才。他們都是付出比別人更多的努力，以及對於研究的熱忱及堅持，才能得到這樣的殊榮。今天，就來介紹一位傑出的科學家，今年諾貝爾生醫獎得主——大隅良典。

DNA 也會玩大風吹？？＿Loop-mediated Isothermal Amplification

整理・撰文：王如初

有玩過大風吹嗎?一群小孩子，配上一定少一把的幾張椅子： 「大風吹!」「吹什麼?」「吹有穿/戴□□的人!」，聽這樣的指令，所有符合條件的小朋友瘋狂的尋找空位，而沒搶到的孩子就只好當下一場遊戲的司令，聚精會神的尋找其他人的共同點。

面對難關，不可或缺的夥伴們——PCR Additives & Enhancers

整理・撰文：梁博任

各位在忙完實驗的閒暇時間，是否會安排休閒活動好好的犒賞一下自己並充充電呢? 小編在這時呢，最愛揪朋友去 KTV 唱歌了。特別是當人手一支麥克風，一同唱出周華健經典的 「朋友」 時，當下真的會覺得平常所遇到的任何難關真的都沒什麼大不了的。其實，不只是我們，在 PCR 的過程中，難免也會遇到一些問題，這時就需要透過一些好朋友的幫助，共同闖蕩這些關卡。那這些好朋友們有誰呢？就讓我們來一同認識一下……

一次快速檢測食品中多種病原菌不是夢！－－多重 PCR（Multiplex PCR）

撰文、整理：鄭宇恆

圖片來源：http://www.huffingtonpost.com/brian-kennell/why-food-safety-matters_b_7544340.html

近年來大家對食品安全可說是越來越重視，安全的食品除了需要檢驗有無非法添加劑、重金屬等外，還需要檢測微生物含量是否超標，或是否遭到致病性微生物汙染。所以今天小編就來介紹一種可以應用在食品上的 PCR 技策略－－多重 PCR（Multiplex PCR）！

DNA 終極解碼器---Inverse PCR

整理・撰文：楊孟勳

https://pixabay.com/zh/%E8%AE%BF%E9%97%AE%E6%95%B0%E6%8D%AE-%E5%AF%86%E7%A0%81-%E6%8E%A9%E7%A0%81-%E7%9F%A9%E9%98%B5-%E5%B4%A9%E6%BA%83-%E5%AE%89%E5%85%A8-%E7%AE%A1%E7%90%86%E5%91%98-%E6%94%BB%E5%87%BB-694542/

颱風天剛過，希望大家都平安，不知道大家都在颱風天做什麼呢？聽到外面強烈的風聲及雨聲，小編會戴上耳機將電腦音樂調到最大聲，這樣除了可以使我專心做事之外，也可以掩蓋窗外那令人恐懼的風雨嘶吼聲。

不過說到電腦的音樂檔，不知道你們知不知道，其實電腦的音樂檔也像 DNA 一樣是一串密碼喔！只是他是透過音頻解碼器來組合邏輯電路，將二進制代碼翻譯為特定的對象，藉此發出各種聲音，組合成好聽的音樂。哈！以上太複雜聽不懂沒關係，簡單來說，就是可以透過解碼器來解開一連串複雜的密碼～

那對於 DNA 來說，也有專屬他的解碼器喔～這次小編就來介紹一個屬於 DNA 的終極解碼器－Inverse PCR，就讓我們一起解出 DNA 的交響樂吧！！

RT-PCR vs. Real-time PCR 還在傻傻分不清楚?

整理・撰文：盛威智

(圖為台北市立動物園提供)

動保議題在近幾年是大眾越來越關心的話題，而因棲地減少和破碎化，許多動物都面臨著生存威脅。石虎，是除了可能滅絕的雲豹外，台灣僅存的原生貓科動物，若你在野外看到，你有能力去分辨它與家貓的差異之處嗎? 石虎的耳後有白色的斑塊，雙眼內側有兩道白色條紋，而身上則有很多像錢幣大小的黑色斑塊，下次若遇見牠可別再和一般的貓咪搞混了呢！

生活中常有許多事情會搞混，而種類多變的PCR當然也不例外，大家還記得幾個星期以前向你們介紹的Real - time polymerase chain reaction，qPCR嗎?，今天小編要介紹的是，就算是科學家有時候也會把它跟Real - time PCR搞混的RT-PCR，全名為逆轉錄聚合酶鏈鎖反應(Reverse transcription polymerase chain reaction)

長的！哎呀！我的 band 出不來啊！—— Long Range PCR

整理・撰文：李俊廷

蓋一棟高樓大廈並不是一件簡單的事，從力學角度來說，高樓大廈的梁柱必須承受比一般房子更大的壓力，同時，樓側需要抗衡強風的受力面積也超過一般的建築。你能想像要經過如何精密的計算才能設計出長長的高塔嗎？如同長長的高塔難以用一般的建築方式完工，長長的 DNA 片段也不易以一般的 PCR 條件製備。在這次的溫故知新小天地裡，小編將簡單介紹長片段聚合酶連鎖反應 (Long range PCR, L-PCR) 這項字面上看似簡單，骨子裡卻不單純的技術。

你不可不知道的 PCR 小技巧 —— HOT START PCR

整理・撰文：楊孟勳、郭芷麟

其實不論做任何實驗，最常碰到的實驗技巧一定都是 PCR。PCR 的發明帶給人類科學研究上許多便利。在我們開始學實驗技術時，就算知道實驗的基礎原理，還是會有許多不同的實驗結果產生。要克服這些問題，除了自己努力嘗試各種方式之外，也可以依靠專業人士的經驗傳承。

在這裡，就來分享一個只要 PCR 失敗過一次就會用到，改善 PCR 非專一性產物的最簡單方法——熱啟動聚合酶連鎖反應 (Hot start PCR)。

房屋仲介”有巢氏”，PCR也有巢式! —— Nested Polymerase Chain Reaction)

整理，撰文:林沁融

對PCR來說，最令人困擾的莫過於非專一性的片段產生。所以為了預防這種事情發生，我們想了許多的方法來解決。上禮拜提到先將溫度調高，在逐漸調低溫度；或是額外加入添加劑，都是不錯的方法。那這次要介紹的是另一種方法，同樣可以提高專一性的巢式聚合酶鏈鎖反應 （Nested PCR）。

產物的結果不專一嗎? 來試試Touchdown PCR!!!!!!

整理・撰文：盛威智

PCR技術在現今的生技領域中已被廣泛的使用，然而在做實驗時，時常會遇到非專一性產物產生的情況，影響到我們對結果的判讀，原因有可能是Primer設計的不好、template可能有較多的GC-Rich或是annealing選定的溫度不適當等等。

過去你可能會選擇加入一些添加劑 (如DMSO、Betaine、formamide) 或是重新去抓合適的annealing條件。而今天要跟大家介紹的是一項可以將我們不理想的結果，在設定條件時直接優化的技術，那就是遞減式聚合酶鏈鎖反應。

小小的巧思，大大的運用，PCR 如何成為基因分析利器! —— Real time PCR

整理・撰文：鄭宇恆、郭芷麟

今天我們來跟大家分享一下近年來普遍被使用的 PCR 技術，即時聚合酶鏈鎖反應。全名為：Real - time polymerase chain reaction，Real - time PCR，又可以稱為定量即時聚合酶鏈鎖反應（Quantitative real time polymerase chain reaction， Q-PCR）。

相信有在做實驗的大家對此技術並不陌生，那如果還沒使用過這個技術，也應該有做過一般的 PCR 實驗吧！一般的 PCR實驗，我們都是用來擴增微量的 DNA，而此技術的原理也是一樣的，只是多了在PCR 反應溶液中添加螢光物質 (DNA binding dye or Probe)，當反應循環數增加，目標 DNA 產物濃度也會以倍數成長，再藉由儀器偵測每個 cycle 所產生的螢光訊號。藉由電腦分析 PCR cycle 與螢光讀值間的關係，即可進行實驗結果的判讀!

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但是我們並不以此自滿，精益求精一直是 Ten Giga Bio 的精神，我們希望能不斷為大家帶來更棒的產品，為努力做實驗的各位解決實驗室可能碰到的各種 PCR 問題！