長的！哎呀！我的 band 出不來啊！—— Long Range PCR

整理・撰文：李俊廷

蓋一棟高樓大廈並不是一件簡單的事，從力學角度來說，高樓大廈的梁柱必須承受比一般房子更大的壓力，同時，樓側需要抗衡強風的受力面積也超過一般的建築。你能想像要經過如何精密的計算才能設計出長長的高塔嗎？如同長長的高塔難以用一般的建築方式完工，長長的 DNA 片段也不易以一般的 PCR 條件製備。在這次的溫故知新小天地裡，小編將簡單介紹長片段聚合酶連鎖反應 (Long range PCR, L-PCR) 這項字面上看似簡單，骨子裡卻不單純的技術。

你不可不知道的 PCR 小技巧 —— HOT START PCR

整理・撰文：楊孟勳、郭芷麟

其實不論做任何實驗，最常碰到的實驗技巧一定都是 PCR。PCR 的發明帶給人類科學研究上許多便利。在我們開始學實驗技術時，就算知道實驗的基礎原理，還是會有許多不同的實驗結果產生。要克服這些問題，除了自己努力嘗試各種方式之外，也可以依靠專業人士的經驗傳承。

在這裡，就來分享一個只要 PCR 失敗過一次就會用到，改善 PCR 非專一性產物的最簡單方法——熱啟動聚合酶連鎖反應 (Hot start PCR)。

房屋仲介”有巢氏”，PCR也有巢式! —— Nested Polymerase Chain Reaction)

整理，撰文:林沁融

對PCR來說，最令人困擾的莫過於非專一性的片段產生。所以為了預防這種事情發生，我們想了許多的方法來解決。上禮拜提到先將溫度調高，在逐漸調低溫度；或是額外加入添加劑，都是不錯的方法。那這次要介紹的是另一種方法，同樣可以提高專一性的巢式聚合酶鏈鎖反應 （Nested PCR）。

產物的結果不專一嗎? 來試試Touchdown PCR!!!!!!

整理・撰文：盛威智

PCR技術在現今的生技領域中已被廣泛的使用，然而在做實驗時，時常會遇到非專一性產物產生的情況，影響到我們對結果的判讀，原因有可能是Primer設計的不好、template可能有較多的GC-Rich或是annealing選定的溫度不適當等等。

過去你可能會選擇加入一些添加劑 (如DMSO、Betaine、formamide) 或是重新去抓合適的annealing條件。而今天要跟大家介紹的是一項可以將我們不理想的結果，在設定條件時直接優化的技術，那就是遞減式聚合酶鏈鎖反應。

小小的巧思，大大的運用，PCR 如何成為基因分析利器! —— Real time PCR

整理・撰文：鄭宇恆、郭芷麟

今天我們來跟大家分享一下近年來普遍被使用的 PCR 技術，即時聚合酶鏈鎖反應。全名為：Real - time polymerase chain reaction，Real - time PCR，又可以稱為定量即時聚合酶鏈鎖反應（Quantitative real time polymerase chain reaction， Q-PCR）。

相信有在做實驗的大家對此技術並不陌生，那如果還沒使用過這個技術，也應該有做過一般的 PCR 實驗吧！一般的 PCR實驗，我們都是用來擴增微量的 DNA，而此技術的原理也是一樣的，只是多了在PCR 反應溶液中添加螢光物質 (DNA binding dye or Probe)，當反應循環數增加，目標 DNA 產物濃度也會以倍數成長，再藉由儀器偵測每個 cycle 所產生的螢光訊號。藉由電腦分析 PCR cycle 與螢光讀值間的關係，即可進行實驗結果的判讀!