是誰給了科學家們和醫療人員滿滿的「大平台」！？——Recombinase Polymerase Amplification 之應用與限制

圖片來源：WIKIPEDIA,CC licensed

整理・撰文：王如初、郭芷麟

 繼上一篇了解了 Recombinase Polymerase Amplification (RPA) （全文請點閱此） 的基本原理後，接下來就來跟大家說說這樣的技術，目前有怎樣的應用～

1.       茲卡病毒 (Zika virus) 的尿液快篩

目前茲卡病人篩檢主要是利用Real-time RT-PCR，需要將檢體送到設備齊全的實驗室才能操作。但是，在「資源缺乏的疫區」，我們更需要的是快速方便的檢測方法。

於是有臨床研究人員開發出 reverse transcription isothermal recombinase polymerase amplification (RT-RPA)  檢測技術來篩檢茲卡病毒。它的檢測設備方便攜帶，靈敏度高 (21個 RNA 分子即可檢測)，檢測時間短 (3~15分鐘)，是未來在資源缺乏、大規模感染的疫區一個非常有展望的檢測技術。

http://biorxiv.org/content/early/2016/10/03/078501

2.      精確醫學：癌症客製化標靶治療

癌症在起始、發展及轉移三個階段都會表現不同的分子亞型，稱之為癌症異質性。精確醫學的目的就是結合診斷技術，以及利用這個異質性來針對每個癌症患者的分子亞型，量身訂製治療方法。

在許多開發方法中，RPA 這個技術又躍出水面向大家招手，因為它的靈敏度高且所需時間短 (約80分鐘)，是目前一個非常令人期待的平台來檢測癌症的 RNA 生物標誌來滿足醫療需求。

http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/smll.201602161/abstract

大家有沒有發現，RPA 大多用在病毒、細菌感染的快速篩檢，來達到方便、快速、高靈敏度這個目的。讓醫療人員可以更有效率地去進行檢測，使能夠迅速做出對於病患最好的相對應治療方法。

雖然 RPA 看似方便且效果很好，但再好的技術都還是會有一些缺點的！有些科學家指出，RPA 其實不太能夠辨識非常相似的序列；也有科學家指出，RPA 對於一些 contaminants 或是 off-target nucleic acid contamination 更為敏感。

但以上這些缺點，都是由不同的科學家使用之後，所指出的一些問題，然而，並不是每位科學家都會遇到同樣的問題。所以，或許因為 RPA 這個技術近幾年才被科學家們廣泛使用，所以對於他的特性以及條件，都尚未非常熟悉ㄋ。

儘管如此，RPA 還是給予了科學們、病患以及醫療人員滿滿的「大平台」～是一項偉大的 PCR 技術！

資料來源：

1. Toward Precision Medicine: A Cancer Molecular Subtyping Nano-Strategy for RNA Biomarkers in Tumor and Urine,Kevin M. Koo.al , 26 September 2016

2. Rapid molecular detection of Zika virus in urine using the recombinase polymerase amplification assay, Ahmed Abd El Wahed, http://dx.doi.org/10.1101/078501

3.  https://www.researchgate.net/post/How_reliable_is_recombinase_polymerse_amplification_as_a_diagnostic_tool