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2015年12月30日 星期三

一滴血就可以直接做 PCR,係金ㄟ!


許多的檢驗工作都需要採用血液樣品來進行實驗,像是檢查血液檢體中是否含有病毒,或是做基因型別鑑定,甚至像是 CSI 犯罪現場等刑事鑑定,也常常需要對血液進行 PCR 實驗。但是用血液來做 PCR 通常必須先經過繁複的純化步驟,這是因為血液中含有大量的血色素 (Heme) 會干擾 PCR 的進行。由有甚者,為了方便保存及運送,一些臨床的血液樣品會添加抗凝血劑,如 EDTA 或者 Heparin 等,而這些物質更是 PCR 的強力抑制劑,所以也必須透過純化的過程移除。

但是純化血液樣品需要額外的純化套組的花費,也需要更多的工作時間。特別是臨床樣品數目很多的時候,多幾個步驟真的會多花上半天一天的工作時間。因此很多從事臨床檢驗的朋友向我們反應,Ten Giga Bio 是否有可能發展一個更方便的試劑來造福大家呢?
我們聽到了大家的需求,也很努力地想滿足大家。其實在 PCR 的反應中,高溫變性的步驟是足以破壞細胞組織,讓 DNA 模板釋放出來。所以本來我們特別製備的 PreMix 配方,是可以不經純化,直接把樣品加入 PreMix 就可以進行所謂的 Direct PCR 反應。但問題出在血液樣品的 Heme 與其他干擾物質,即使加熱處理後,仍然會造成 DNA 聚合酶難以進行反應。像是一般的 Taq,僅僅只要在反應中加入 1% 的血液,原本應該放得出來的 PCR 產物就做不出來了!
針對這個問題,Ten Giga Bio 花了很多的功夫,調教我們的酵素以及反應緩衝液的配方,而推出 Rally PreMix 這項我們很有信心的新產品。在我們的測試中,直接在 PCR 反應中加入不同量的血液進行反應。不論血液是使用 EDTA 或是 heparin 作為抗凝劑,我們的 Rally PreMix 都至少可以耐受總體積 25 % 的血液。也就是說,一滴血 (約 20 uL) 只要用 ddH2O 稀釋一倍之後,加入我們的 Rally PreMix 就可以直接進行 PCR 實驗了 (註)。免除您繁瑣的萃取 DNA 步驟,使您可以方便、快速地進行大量的篩選實驗,同時節省您的寶貴時間與研究經費。
這是不是給正在辛苦與實驗奮戰的大家一個很棒的聖誕禮物呢?特別是現在 Rally PreMix 正在舉行上市特惠活動,歡迎來電洽詢選購喔!
註:血液 Direct PCR 建議目標蛋白質長度在 1 kb 以內,同時 PCR primer pair 選擇與 PCR 條件也會對實驗結果產生影響。本公司測試的基因為人類 methyltransferase 基因,目標長度為 0.5 kb。

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